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MitoRibo-Seq
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线粒体核糖体印迹技术(MitoRiboSeq)。MitoRiboSeq可以实现哺乳动物中细胞线粒体翻译的高分辨率表征,为线粒体疾病研究提供了新的机制角度。
MitoRiboSeq基于核糖体保护片段(RPFs)的测序原理,利用低浓度RNase处理细胞样本,保留被核糖体覆盖的RNA片段(即核糖体足迹,RFPs),随后通过高通量测序定位正在翻译的RNA序列。线粒体核糖体(55S)与细胞质核糖体(80S)在结构与丰度上差异显著,需通过蔗糖梯度离心等步骤分离。